波长为546nm的频率,546nm等于多少m

  

  染料在生物化学中最早的应用是直接对切片进行染色,然后观察。随着生物技术、计算机技术和荧光光谱技术的不断发展,许多染料,尤其是荧光染料,已经广泛应用于细胞检测、肿瘤基因蛋白分析、毒物分析、临床医学诊断等方面。荧光染料一般是指在吸收某一波长的光波后,能发出另一种波长大于被吸收光波长的光波的物质。荧光染料抗体标记分析在现代生物免疫学领域得到广泛应用,并逐渐显示出明显的优势。下面简单介绍一下用于标记抗体的荧光染料及其类型:   

  

  1.荧光素染料,包括异硫氰酸荧光素(FITC)、羟基荧光素(FAM)、四氯荧光素(TET)等。这是一种苯环较多的化合物。FITC是应用最广泛的一种(如FITC标记的组织荧光图所示),它被488nm的氩离子激光激发,发出525nm的蓝绿色荧光。FITC能与多种抗体蛋白结合,在碱性溶液中稳定显示蓝绿色荧光。   

  

  2.罗丹明染料,包括红色罗丹明(RBITC)、四甲基罗丹明(TAMRA)、罗丹明B(TRITC)等。TRITC在550nm激发下能发出570 nm的黄色荧光。   

  

  Cy系列菁染料,菁染料通常由两个杂环体系组成,包括Cy2、Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy7及其类似物。   

  

  4.Alexa系列染料,是分子探针开发的一系列荧光染料。它的激发光和发射光光谱覆盖了大部分可见光和部分红外光谱,因此应用广泛。其特点是高亮度、稳定性、仪器兼容性、多种颜色、pH不敏感和水溶性。包括Alexa Fluor 350、405、430、488、532、546、555、568、594、610、633、647、680、700、750。目前,Alexa系列染料在市场上广泛使用,并逐渐取代传统的荧光染料。比如Alexa Fluor 488可以替代FITC和Cy2;Alexa Fluor 555可以替代Cy3和TAMRA;Alexa Fluor 633可以替代APC、Cy5等。   

  

  5.蛋白质染料,包括藻红蛋白(PE)、藻蓝蛋白(PC)、别藻蓝蛋白(APC)、聚藻蓝蛋白-叶绿素蛋白(preCP)等。其中大部分是蓝藻中发现的蛋白质。这类荧光染料可与Cy系列菁染料偶联形成复合染料用于抗体标记。如PE-Cy3/Cy5/Cy7、APC-Cy7、PerCP-Cy5.5等。   

  

  对于科研工作者来说,如何选择合适的荧光染料?理想的荧光染料一般具有以下特征:   

  

  1.它具有高光子产额和高信号强度;   

  

  2.强烈吸收激发光,降低背景信号;   

  

  3.激发光谱与发射光谱距离大,减少了背景信号的干扰;   

  

  4.易于与标记的抗原、抗体或其他生物物质结合,不影响标记物质的特异性;   

  

  5.稳定性好,不易受光线、温度、PH值、样品抗凝剂和固定剂的影响。   

  

  用户可以根据仪器和实验的要求选择相应的荧光染料。   

  

     

  

  图。IF:大鼠肾组织(左)和大鼠胃组织(右)的FITC染色   

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