粗DNA提取与鉴定实验是高考大纲中的考点之一，但在必修和选修三中没有出现，所以容易被忽略。列出考试重点，快速学习。 　　

　　提取生物大分子的基本思想是选择一定的物理或化学方法，分离出具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提，就是利用DNA与RNA、蛋白质、脂类之间的理化性质差异，提取DNA，去除其他成分。 　　

　　1. DNA的溶解性 　　

　　其他成分如DNA蛋白在不同浓度的NaCl溶液中具有不同的溶解度。利用这一特性，选择合适的盐浓度，可以使DNA充分溶解，沉淀杂质，反之亦然，从而达到分离的目的。 　　

　　2. DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 　　

　　蛋白酶可以水解蛋白质，但对DNA没有影响。大多数蛋白质不能承受60-800摄氏度的高温，但DNA会在800摄氏度以上变性。洗涤剂可以破坏细胞膜，但对DNA没有影响。 　　

　　3. DNA的鉴定 　　

　　在沸水浴中，DNA接触二苯胺会被染成蓝色。 　　

　　4. 实验材料的选取 　　

　　所有含DNA的生物材料都可以考虑，但DNA含量相对较高的生物组织更容易成功。 　　

　　5. 破碎细胞，获取含DNA的滤液 　　

　　在鸡血细胞溶液中加入一定量的蒸馏水，用玻璃棒搅拌，过滤，收集滤液。如果实验材料是植物细胞，加入一定量的洗涤剂和盐，充分搅拌研磨，过滤后收集研磨液。 　　

　　6. 去除滤液中的杂质 　　

　　方案1的原理是DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同；第二种方案的原理是蛋白酶分解蛋白质而不分解DNA；第三种方案的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。 　　

　　特别提醒： 　　

　　为什么反复溶解沉淀DNA可以去除杂质？ 　　

　　用高盐浓度溶液溶解DNA，可以去除高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度沉淀DNA，可以去除溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过重复溶解和沉淀DNA，可以除去与DNA的溶解度不同的各种杂质。 　　

　　方案二和方案三的原理有什么区别？ 　　

　　方案二是用蛋白酶分解杂质蛋白，使提取的DNA与蛋白分离；第三种方案利用DNA和蛋白质耐高温的差异，使蛋白质变性，与DNA分离。 　　

　　7. DNA的析出与鉴定 　　

　　过滤处理后的溶液，加入与滤液等体积的冷却酒精溶液，并在两个试管中加入4ml二苯胺试剂。混合均匀后，将试管在沸水中加热5分钟。试管冷却后，比较两个试管溶液的颜色变化，看溶解DNA的溶液是否变成蓝色。 　　

　　8. 以血液为实验材料时 　　

　　每100毫升血液中应加入3g柠檬酸钠，以防止血液凝固。 　　

　　9. 二苯胺试剂 　　

　　现在就用，不然影响鉴定效果。 　　

　　10. DNA的溶解度与NaCl溶液浓度的关系： 　　

　　当NaCl溶液的浓度低于0.14mol/L时，DNA的溶解度随浓度的增加而降低。当NaCl溶液的浓度高于0.14mol/L时，DNA的溶解度随浓度的增加而增加。实验选用2mol/lNaCl和0.015mol/lNaCl作为溶出试剂。 　　

　　11. 盛放鸡血细胞液的容器 　　

　　优选塑料容器。